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- 產(chǎn)品名稱(chēng): Mycoplasma PCR Test Kit
- 產(chǎn)品貨號(hào): CSK00002
- 貨期: 現(xiàn)貨
- 價(jià)格與訂購(gòu): 2800
- 數(shù)量:
- 規(guī)格:
- 產(chǎn)品信息
- 如何訂購(gòu)
概述(Summary)icon
產(chǎn)品英文名(Product Name)
Mycoplasma PCR Test Kit
產(chǎn)品中文名
支原體PCR檢測(cè)試劑盒
產(chǎn)品描述(Description)
支原體PCR檢測(cè)試劑盒是一款具有快速、靈敏、特異性高等特點(diǎn)的支原體檢測(cè)試劑盒,可用于細(xì)胞、培養(yǎng)基、動(dòng)物血清等的支原體檢測(cè)。本產(chǎn)品通過(guò)聚合酶鏈?zhǔn)椒磻?yīng)技術(shù)(PCR)特異擴(kuò)增支原體16s rRNA 基因保守區(qū)域片段,進(jìn)行支原體檢測(cè),能夠檢測(cè)包括M. arthritidis,M. hominis,M. hyorhinis,M. fermentans,M. orale,M. salivarium,M. bovis,M. bovigenitalium,M.pneumoniae,M. pirum等在內(nèi)的數(shù)十種常見(jiàn)支原體。
儲(chǔ)存條件(Storage)
儲(chǔ)存于-15 ~ -25℃。
運(yùn)輸方式(Shipping)
干冰運(yùn)輸。
Note
For research use only .
使用方法(Standard Operating Procedure)icon
1. 收取待檢樣品。貼壁細(xì)胞:待細(xì)胞生長(zhǎng)至80%左右即可,使用細(xì)胞刮刀刮取細(xì)胞(送檢細(xì)胞不能用消化液消化細(xì)胞);懸浮細(xì)胞:待細(xì)胞生長(zhǎng)至80%左右即可直接進(jìn)入下一步離心;
2. 1000rpm離心5min,棄上清,留100-200μl培養(yǎng)基重懸細(xì)胞,沸水浴10min;
3. 將煮沸的細(xì)胞懸浮液12000rpm離心3-5min;
4. 所得樣品取4μl直接用于PCR檢測(cè),或凍存于-20℃?zhèn)溆茫?/p>
注:一般以6孔板接種細(xì)胞,當(dāng)細(xì)胞生長(zhǎng)至80-90%時(shí)即可取樣進(jìn)行檢測(cè)。培養(yǎng)液中的青霉素和鏈霉素不會(huì)影響檢測(cè)效果。
5. PCR檢測(cè)
5.1充分融化PCR反應(yīng)液,按照下表配制PCR反應(yīng)體系:
組分 | 陽(yáng)性對(duì)照組 | 陰性對(duì)照組 | 實(shí)驗(yàn)組 |
PCR反應(yīng)液 | 14μl | 14μl | 14μl |
引物 | 2μl | 2μl | 2μl |
陽(yáng)性對(duì)照 | 4μl | - | - |
待檢樣本 | - | - | 4μl |
ddH2O | - | 4μl | - |
5.2 將PCR反應(yīng)管放入PCR儀,參照以下參數(shù)運(yùn)行PCR反應(yīng)程序:
程序 | 運(yùn)行參數(shù) | 循環(huán)數(shù) | |
預(yù)變性 | 94℃ 5min | - | |
循環(huán) | 變性 | 94℃ 30s | 30 |
退火 | 55℃ 30s | ||
延伸 | 72℃ 15s | ||
延伸 | 72℃ 5min | - |
5.3瓊脂糖凝膠電泳。
6. 凝膠成像觀察
注:支原體陽(yáng)性細(xì)胞擴(kuò)增片段約270bp。
M :marker
+ :陽(yáng)性對(duì)照
- :陰性對(duì)照
1-3:檢測(cè)為陽(yáng)性的細(xì)胞
4-5:檢測(cè)為陰性的細(xì)胞