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  • 產(chǎn)品名稱(chēng): DNA膠回收試劑盒
  • 產(chǎn)品貨號(hào): CSHZDGEK200-I
  • 貨期: 現(xiàn)貨
  • 價(jià)格與訂購(gòu): 1200
  • 數(shù)量:
    庫(kù)存: 100
  • 規(guī)格: 200T
  • 產(chǎn)品信息
  • 如何訂購(gòu)
    產(chǎn)品介紹
    本試劑盒采用可以高效、專(zhuān)一結(jié)合DNA 的硅基質(zhì)材料和獨(dú)特的緩沖液系統(tǒng),從TAE 或TBE 瓊脂糖凝膠上回收100bp-30kbDNA 片段,有機(jī)化合回收率高達(dá)80%,每個(gè)離心吸附柱每次可吸附的DNA 量為10 μg同時(shí)除去蛋白質(zhì)、其它雜物、無(wú)機(jī)鹽離子及寡核苷酸引物等雜質(zhì)。
    產(chǎn)品特點(diǎn)
    快速:整個(gè)操作過(guò)程快速方便,十幾分鐘即可完成回收工作。
    多樣:可以回收單鏈、雙鏈DNA 片段以及環(huán)狀質(zhì)粒DNA。
    高效:可以高效回收目的DNA。
    內(nèi)裝
    產(chǎn)品名稱(chēng) 規(guī)格 用途 儲(chǔ)存條件
    MTB溶液  160ml 溶膠 25-30℃可保存6個(gè)月
    CB溶液 40ml 漂洗,脫鹽(使用前加入160ml無(wú)水乙醇) 25-30℃可保存6個(gè)月
    EB溶液 6ml 洗脫DNA  25-30℃可保存6個(gè)月
    NB溶液 1ml 調(diào)節(jié)溶膠后溶液pH值 25-30℃可保存6個(gè)月
    吸附柱 200個(gè) 結(jié)合DNA 干燥避光下保存12個(gè)月
    收集管(2ml)  200個(gè) 收集吸附柱離心后的液體 干燥避光下保存12個(gè)月

    所有溶液應(yīng)該是澄清的,如果環(huán)境溫度低 溶液靜置時(shí)間久,可能會(huì)有沉淀形成,屬于正?,F(xiàn)象,使用前可在37℃水浴中溫浴5-10分鐘。

    操作步驟
    1在紫外燈下,用干凈刀片將所需回收的DNA條帶切下,盡量切除多余部分,得到的凝膠體積越小越好。
    注意:電泳時(shí)最好選用新的TAE電泳緩沖液;紫外燈下切膠時(shí)間不宜過(guò)長(zhǎng)。
    2.將切下的含有DNA條帶的凝膠放入15ml離心管中,加入750ulMTB溶液,55℃水浴或金屬浴放置10-15分鐘,每隔5分鐘上下顛倒數(shù)次,以確保膠塊充分溶解。
    注意:如果膠塊體積過(guò)大,可將膠塊切碎;溶膠后,若溶液的顏色變?yōu)榻奂t色或紫色,應(yīng)加入5-10ulNB溶液,使其變回淡黃色;對(duì)于回收的DNA片段<500bp時(shí),待膠塊完全溶解,可加入同等膠塊體積的異丙醇,上下顛倒混勻后再過(guò)吸附柱,有利于提高DNA回收率。
    3.將上一步所得溶液加入到已裝入收集管的吸附柱中,室溫12000rpm離心1分鐘,棄掉收集管中的廢液,將吸附柱重新放回收集管中。
    注意:吸附柱容積為800ul,溶膠后溶液體積大于800ul可分兩次加入。
    4.向吸附柱中加入500ulCB溶液(使用前加入無(wú)水乙醇),室溫12000rpm離心1分鐘,棄掉收集管中的廢液,將吸附柱重新放回收集管中。
    注意:如果純化的DNA用于鹽敏感的實(shí)驗(yàn),建議加入CB溶液后靜置2分鐘再離心。
    5.重復(fù)步驟4一次。
    注意:此步驟目的是洗去吸附柱上的鹽和其他離子,不應(yīng)省略。
    6室溫12000rpm離心2分鐘,徹底去除吸附柱中的漂洗液,丟棄收集管,將吸附柱置于一個(gè)新的離心管中。
    7開(kāi)蓋室溫靜置5分鐘,向吸附柱中間部位的吸附膜滴加15-25ulEB溶液。
    8.扣蓋室溫靜置5分鐘,室溫12000rpm離心2分鐘,將DNA溶液收集至離心管中。
    注意:可將收集的DNA溶液再次加入至吸附柱中離心,也可將EB溶液溫浴至70℃后再進(jìn)行洗脫,以提高DNA的回收率;洗脫液的pH值會(huì)影響洗脫效率,若用ddH2O洗脫,應(yīng)確保其pH值在7.0-8.5范圍內(nèi)。
    DNA的檢測(cè)
    實(shí)驗(yàn)室常用1%瓊脂糖凝膠電泳檢測(cè)回收的DNA片段純度。測(cè)DNA濃度時(shí),OD/OD比值應(yīng)在1.7-19范圍內(nèi),1.8為最佳。
    Note
    For research use only .