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- 產(chǎn)品名稱: M-MLV(H-) Reverse Transcriptase
- 產(chǎn)品貨號: CSRT0910
- 貨期: 現(xiàn)貨
- 價格與訂購: 400
- 數(shù)量:
- 規(guī)格: 10KU
- 產(chǎn)品信息
- 如何訂購
產(chǎn)品概述
M-MLV(H-) Reverse Transcriptase是通過體外大腸桿菌表達體系分子進化技術篩選獲得的全新逆轉錄酶,與原始逆轉錄酶相比,MMLV(H-) Reverse Transcriptase大幅提高了熱穩(wěn)定性,在50℃的半衰期超過4h,可將逆轉錄溫度提高至50-55℃,避免RNA復雜二級
結構對cDNA合成的抑制,可有效合成高質量的cDNA。同時,M-MLV(H-) Reverse Transcriptase增加了多個點突變,增強了模板親和
力和行進性,使得全長cDNA的合成能力有了大幅度提升,對于常見的逆轉錄抑制物具有更高的耐受度,非常適合于富含多糖多酚的植
物組織RNA的逆轉錄反應。
產(chǎn)品組分
組 分 | CSRT0910 (10,000 U) |
M-MLV(H-) Reverse Transcriptase (200 U/μl) | 50 μl |
保存條件
-30 ~ -15℃保存,≤0℃運輸。
適用范圍
本產(chǎn)品廣泛適用于動物、植物以及微生物RNA的逆轉錄反應。
適用場景
RT-PCR擴增;
鏈cDNA合成;
制備cDNA探針;
合成具有高比例全長cDNAs的cDNA文庫。
單位定義
以Poly(rA)·Oligo(dT)為模板/引物,在37℃,10 min條件下,摻入1 nmol的dTTP為酸不溶性物質所需要的酶量定義為1個活性單位(U)。
注意事項
防止RNase污染
請保持實驗區(qū)域潔凈;操作時需穿戴干凈的手套、口罩;實驗所用的離心管、槍頭等耗材均需保證RNase-free。
引物選擇
1.后續(xù)實驗為PCR
如果模板為真核生物來源,一般情況下首選Oligo dT,與真核生物mRNA的3' Poly A尾配對,可獲得最高產(chǎn)量的全長cDNA。
基因特異性引物(GSP)的特異性最高。但有些情況下,用于PCR反應的GSP無法有效引導第一鏈cDNA合成。這時,可改用Oligo dT或
Random hexamers重新進行逆轉錄。
Random hexamers特異性最低,所有RNA,包括mRNA,rRNA,tRNA均可以作為Random hexamers的模板。當目標區(qū)域具有復雜
二級結構或GC含量較高,或模板為原核生物來源,使用Oligo dT或基因特異性引物(GSP)無法有效引導cDNA合成時,可使用Random
hexamers為引物。
2.后續(xù)實驗為qPCR
將Oligo dT與Random hexamers混合使用,可使mRNA的各個區(qū)域cDNA合成效率相同,有助于提高定量結果的真實性和重復性。
Note
For research use only .